सेल संस्कृतिहरूको क्रिप्ट्रेजको लागि आधारभूत सुझावहरू

सेल संस्कृतिहरूको क्रिप्ट्रेजको लागि आधारभूत सुझावहरू

सेलहरूले सामान्य बृद्धि गतिविधिहरूको अवधिमा उनीहरूको नर्भलवाद जारी राख्छन्, जसले विभिन्न संरचनाको सहभागिताको आवश्यकता पर्दछ। जब तापमान -700 डिग्री सेल्सियस तल झर्छ, प्रिसेजले काम गर्न रोक्दछ। तसर्थ, अत्यन्त कम तापक्रमको साथ, कोषहरूमा, कोषहरूले उनीहरूको मेटाबोलिक गतिविधिहरू रोक्न र सुस्त राज्यमा प्रवेश गर्न सक्दछन् जसले दीर्घकालीन भण्डारणलाई अनुमति दिन्छ।

1. प्रयोगात्मक सामग्री

आधार सामग्री:

आधारभूत संस्कृति मध्यम

सीरम (परम्परागत एफबीएस / एनबीएस)

अल्ट्रारारी वर्कबंच

बाँझो dimethyly sulfaxide (DMOSO)

बाँझ पीबीएफेटे बफर नुन समाधान

पाइपेटिंग बन्दुक

बिजुली पाइपेटन गन

प्रयोगहरूको तयारी

क) फ्रिजिंग समाधानको तयारी:

सामान्य कोषहरू:% 55% Bals +0% Buvine Buvine Buvine ChaVine (FBS / NBS) +% dmso

महत्वपूर्ण सेलहरू:% 0% BOVININE Curum (FBS / NBS) + 10% dmoo

एक 15 एमएल सेन्टिफाइज ट्यूब [गुँड] मा तयारी क्रोपोरेज समाधान जोखिमलाई छुटाउनुहोस्।

(ख) सेलहरूको तयारी स्थिर हुनु:

कक्षहरू हटाउनु अघि, राम्रो बृद्धि स्थिति र लगप्रथाम वृद्धिको साथ सेलहरू चयन गर्नुहोस् र सेल सर्त कायम राख्न ताजा माध्यममा 12-24 घण्टाको साथ उनीहरूलाई बदल्नुहोस्।

2. प्रयोगात्मक प्रक्रिया

1. कक्षहरूको घनत्व स्थिर हुन, जसमध्ये 800% ~% 0% छ। पुरानो मध्यमलाई आरोपमा पिपेट बन्दूक प्रयोग गर्नुहोस्, कक्षहरू 1-2 चोटि धुने बाँझो पीबीएस थप्नुहोस्, र संस्कृति वातावरणमा बाँकी मध्यम हटाउनुहोस्।

2. ट्रिप्सिन वा पाचन र पाचन को एक उचित रकम थप्नुहोस् कोशिस गर्न अनुमति दिन कोशिस गर्न अनुमति दिन को लागी, र तिनीहरूलाई पाचनका लागि राख्नुहोस्। माइक्रोस्कोपमा कक्षहरूको अवस्था अवलोकन गर्नुहोस्: साइटोप्लाज्म रिटाउँदै छ र कक्षहरू अब पानाहरूमा जोडिएको छैन। यस समयमा, पाचन प्रक्रिया रोक्न रोक्नको लागि स्टप समाधान थप्नुहोस्।

A. सेल निलम्बन गठन गर्न टिपको साथ बिस्तारै सेलहरू बबुल -5--5 मिनेटको लागि 1000 RPM को सलम्बन।

सुपरकन्टलाई खारेज गर्नुहोस्, फ्रिजिंग समाधानको उचित मात्रा थप्नुहोस्, र बिस्तारै पाइपेटेइटलाई समान रूपमा गणना गर्न। क्यूपोरेक्टर घनत्वहरू समायोजित गर्नुहोस् अन्तिम घनत्वको माध्यमको साथ अन्तिम घनता × × 106 / ML ~ 1 × 107 / ML।

Acted। अपेक्षित क्षमता अनुसार क्रान्तिनी ट्युड्सलाई अलग गर्न पिपेट बन्दूक प्रयोग गर्नुहोस्, र एक स्वचालित क्यापिंग मेशिन क्याप र छाप प्रयोग गर्नुहोस्।

The। मानक क्रोपोजेसर प्रोग्रामले -1 ° C -2 ° C / मिनेट हो, र कक्षहरू जलाउनका लागि फ्रिज गर्न सकिन्छ: कोठाको तापक्रम → ° C (20 मिनेट) 20 डिग्री सेल्सियस (mink0 मिनेट) → -80 ° C ° C (घर मा) → तरल नाइट्रोजन मा दीर्घकालीन भण्डारण।

यो -80 ° c मा एक फ्रिजरमा सिधा स्ट्रिम गर्न सकिन्छ र त्यसपछि भण्डारणको लागि तरल नाइट्रोजन सरुवा गरियो।

Yongyyue चिकित्सा मेडिकल एक उच्च-टेक उद्यम छ r & d मा, उत्पादन र बायोन्डियल उपभोगीय को बिक्री। पिपेट्स सुझावहरू, पिपेट्स, pcr प्लेट, सेल संस्कृति उत्पादनहरू र अन्य जैविक प्रयोगशाला उपभोक्ताहरू। Yongyue चिकित्सा मेडिकल तपाईंको विश्वास र छनौट को योग्य छ! परामर्श मा स्वागत छ!